大鼠肝微粒體制備過程中活性保存的關(guān)鍵因素探析

2025-09-18 大鼠肝微粒體制備過程中，活性保存是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的核心環(huán)節(jié)，其關(guān)鍵因素涵蓋從動物處理到最終保存的全流程控制，具體如下：一、動物選擇與預(yù)處理成年健康大鼠是制備高活性微粒體的基礎(chǔ)，因其肝臟代謝能力強(qiáng)、微粒體含量高。實(shí)驗(yàn)前需禁食24小時(shí)以減少肝糖原干擾，提高回收率。若需誘導(dǎo)酶活性，可在處死前5天腹腔注射多氯聯(lián)苯（PCB），劑量為300mg/kg，以增強(qiáng)細(xì)胞色素P450等代謝酶的表達(dá)。二、低溫操作與緩沖液優(yōu)化全程需在0-4℃冰浴環(huán)境中進(jìn)行，避免酶熱變性。緩沖液需維持適宜離子強(qiáng)度與...

兔肝微粒體在各行業(yè)中都發(fā)揮著重要作用

2025-09-15 兔肝微粒體富含細(xì)胞色素P450（CYP450）酶系，成為解析外源性物質(zhì)代謝途徑、評估藥物相互作用與毒性風(fēng)險(xiǎn)的重要生物工具。兔肝微粒體在藥物研發(fā)、環(huán)境毒理、食品安全與基礎(chǔ)生命科學(xué)中發(fā)揮著重要的作用，為人類理解“化學(xué)物質(zhì)在體內(nèi)的命運(yùn)”提供了高效、靈敏的體外模型。一、藥物研發(fā)在新藥開發(fā)早期，兔肝微粒體被廣泛用于評估候選化合物的體外代謝穩(wěn)定性。通過孵育藥物分子與微粒體，在NADPH供能條件下，模擬肝臟Ⅰ相代謝反應(yīng)（如氧化、還原、水解），快速識別代謝“熱點(diǎn)”與潛在毒性代謝物。相比全細(xì)胞...

養(yǎng)原代細(xì)胞，您還為貼壁發(fā)愁嗎？

2025-09-09 引言開學(xué)了，實(shí)驗(yàn)室原代細(xì)胞試驗(yàn)開始了，我的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境（培養(yǎng)箱溫度穩(wěn)定在37±0.5℃，細(xì)胞操作環(huán)境無菌，維持在25℃以上）正常，血清、培養(yǎng)基等也按照SOP正確添加，為啥細(xì)胞貼壁效果不太好？一、原代細(xì)胞為什么要包被？貼壁生長成為原代細(xì)胞體外培養(yǎng)的核心條件，直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和細(xì)胞功能表達(dá)?。在原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要包被處理以增強(qiáng)貼壁能力。二、如何選擇合適的包被材料？為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需要，需要對培養(yǎng)器皿（培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)板）用不同的物質(zhì)包被后使用，既可以促進(jìn)細(xì)胞...

Ⅰ型鼠尾膠原應(yīng)用場景（四）——病理機(jī)制

2025-09-04 一、Ⅰ型鼠尾膠原Ⅰ型鼠尾膠原（Collagenfromrattail,TypeI）是一種天然的培養(yǎng)基，常用于細(xì)胞培養(yǎng)。它是從大鼠尾部肌腱提取的Ⅰ型膠原蛋白溶液，呈液態(tài)，溶解在弱醋酸中保存。它是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的核心成分之一，在體內(nèi)廣泛分布于皮膚、骨骼、肌腱等結(jié)締組織，具有天然的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)可被細(xì)胞表面受體（如整合素α1β1、α2β1）別，從而啟動細(xì)胞黏附與信號傳遞。二、還原病理現(xiàn)場鼠尾膠原通過其三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)（纖維直徑約50-200nm），精準(zhǔn)模擬人體組織中的細(xì)胞外...

超越大鼠模型：為何豬肝微粒體在預(yù)測人類藥物代謝方面更具優(yōu)勢？

2025-08-21 豬肝微粒體在預(yù)測人類藥物代謝方面展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢，其核心優(yōu)勢源于種屬間代謝酶的高度相似性、代謝通路的全面覆蓋以及實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷目刹僮餍裕唧w可從以下三方面解析：一、代謝酶同源性：CYP450亞型與人類高度重疊豬肝臟中細(xì)胞色素P450（CYP450）酶系的亞型分布與人類具有顯著相似性。例如，豬肝微粒體中的CYP3A亞家族（負(fù)責(zé)代謝約50%的臨床藥物）與人類CYP3A4的底物特異性高度一致，而大鼠CYP3A1/2的代謝譜與人類存在差異。此外，豬肝微粒體中的UGT（葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶）和S...

小鼠肝微粒體能夠高效模擬藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程

2025-08-21 在新藥研發(fā)與毒理學(xué)研究領(lǐng)域，小鼠肝微粒體被譽(yù)為探索藥物代謝命運(yùn)的探針，是體外評估化合物代謝穩(wěn)定性、代謝途徑及藥物相互作用的核心工具。其源自小鼠肝臟細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片，經(jīng)勻漿、離心分離后獲得，富含細(xì)胞色素P450（CYP450）酶系、UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT）等Ⅰ相與Ⅱ相代謝酶，能夠高效模擬藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程。一、核心功能：還原體內(nèi)代謝環(huán)境小鼠作為常用的模式生物之一，其肝微粒體中的CYP酶（如CYP3A、CYP2D、CYP2C家族）在功能上與人類部分同工酶具有相似性...

豬肝微粒體能夠幫助更好地理解藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化過程及潛在的毒性反應(yīng)

2025-08-13 豬肝微粒體是從豬肝臟組織中提取的一種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，主要包含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)。這些微粒體富含多種酶系，尤其是細(xì)胞色素P450酶系（CYP450），它們是參與藥物代謝的關(guān)鍵酶類。通過使用豬肝微粒體，研究人員可以在體外條件下模擬肝臟內(nèi)的生化反應(yīng)，從而更好地理解藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化過程及潛在的毒性反應(yīng)。一、制備1、材料準(zhǔn)備選擇新鮮或冷凍保存的豬肝臟作為原料。確保來源可靠，并符合實(shí)驗(yàn)所需的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。準(zhǔn)備必要的實(shí)驗(yàn)器材，如高速離心機(jī)、勻漿器、超聲波破碎儀等，以及各種緩沖液和試劑。2、組織勻漿將豬肝...

Ⅰ型鼠尾膠原應(yīng)用場景（三）——藥物篩選

2025-08-04 一、Ⅰ型鼠尾膠原Ⅰ型鼠尾膠原（Collagenfromrattail,TypeI）是一種天然的培養(yǎng)基，常用于細(xì)胞培養(yǎng)。它是從大鼠尾部肌腱提取的Ⅰ型膠原蛋白溶液，呈液態(tài)，溶解在弱醋酸中保存。它是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的核心成分之一，在體內(nèi)廣泛分布于皮膚、骨骼、肌腱等結(jié)締組織，具有天然的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)可被細(xì)胞表面受體（如整合素α1β1、α2β1）別，從而啟動細(xì)胞黏附與信號傳遞。二、核心優(yōu)勢Ⅰ型鼠尾膠原蛋白因其仿生特性，在藥物篩選中展現(xiàn)出不可替代的核心優(yōu)勢，具體如下：生物相容性...